Análisis del miR106b en los procesos de regeneración muscular esquelética

Abstract

[ES]Introducción: La distrofia muscular de Duchenne (DMD) es una enfermedad neuromuscular caracterizada por una degeneración muscular progresiva. La falta de tratamientos eficaces para esta enfermedad, conllevan a la necesidad de evaluar diferentes enfoques para llevar a cabo un tratamiento óptimo. Estudios in vitro realizados previamente en nuestro laboratorio, demuestran que el miR-106b juega un papel importante en los procesos de proliferación y diferenciación miogénica. En este estudio se investigó el papel del miR-106b en la modulación de los procesos de regeneración muscular esquelética in vivo. Métodos: Para analizar el papel el miR-106b y de factores reguladores miogénicos (MRFs) durante los procesos de regeneración muscular se llevaron a cabo miRNA RT-PCR en modelos murinos C57 inducidos a un daño muscular con cardiotoxina (CTX). Por otra parte, se midieron los perfiles de expresión de los MRFs en ratones Dmdmdx (modelo DMD) durante los procesos de regeneración después del tratamiento con antimiR106b, además se llevó a cabo el treadmill test para medir la resistencia muscular de los ratones Dmdmdx después del tratamiento. Resultados: Encontramos que los niveles de expresión de los MRFs Myf5, MyoD1 y Myog aumentan considerablemente en el día 3, este aumento está asociado a la disminución del miR106b, después del daño muscular en ratones C57 (lesionados con CTX). En ratones DMDmdx los niveles de expresión del miR106b disminuyen significativamente en el día 3 después del tratamiento con AntimiR, esta disminución se correlaciona con el aumento de los MRFs Myf5, MyoD1 y Myog en el mismo periodo de tiempo, favoreciendo los procesos de diferenciación miogénica durante la regeneración muscular. Consistentemente, la treadmill test mostró resultados significativos en la mejora funcional de ratones DMDmdx. Conclusiones: La inhibición del miR106b mejora considerablemente los procesos de regeneración muscular- esquelética in vivo. La utilización de moléculas inhibidoras del miR106b puede llegar a ser un potencial terapéutico para el tratamiento de distrofias musculares.

[EN]Background: Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a neuromuscular disease characterized by progressive muscle degeneration. The lack of effective treatments for this disease, leading to the need to evaluate different approaches to perform optimal treatment. In vitro studies previously conducted in our laboratory demonstrated that miR-106b plays an important role in the processes of proliferation and myogenic differentiation. In this study the role of miR-106b in modulating processes skeletal muscle regeneration in vivo was investigated. Methods: To analyze the role of miR-106b and myogenic regulatory factors (MRFs) during muscle regeneration processes were performed RT-PCR miRNA in murine models C57 induced muscle damage with cardiotoxin (CTX). Moreover, the expression profiles of MRFs were measured in mice Dmdmdx (DMD model) for the regeneration processes after treatment with antimiR106b, also held the treadmill test to measure muscle strength and endurance of mice Dmdmdx after treatment. Results: We found that the levels of expression of the MRFs Myf5, MyoD1 and Myog increase significantly at day 3, this increase is associated with decreased miR106b, after muscle damage in C57 mice (injured with CTX). In DMDmdx expression levels decrease significantly miR106b mice at day 3 after treatment with AntimiR, this decrease correlates with the increase in MRFs Myf5, MyoD1 and Myog in the same period of time, promoting myogenic differentiation processes during muscle regeneration. Consistently, the treadmill test results showed significant improvement in functional DMDmdx mice. Conclusions: MiR106b inhibition significantly improves muscular-skeletal regeneration processes in vivo. The use of molecules inhibiting miR106b can become a therapeutic potential for the treatment of muscular dystrophies.