Análisis de la expresión de distintas isoformas de lncRNAs cardiacos durante el desarrollo embrionario y su modulación por Mef2c

Abstract

[ES] Los lncRNAs han surgido como reguladores claves en multitud de procesos celulares. Entre estos procesos se encuentra el desarrollo embrionario. La embriogénesis cardiaca es un proceso altamente regulado que requiere de la participación de multitud de genes, tanto codificantes como no codificantes, para que se produzca de forma correcta y se genere un corazón funcional capaz de sustentar la vida adulta. En este contexto se han descrito varios lncRNAs cardiacos entre los que destacan Braveheart, Carmn y Fendrr, los cuales ejercen un papel en la embriogénesis temprana cardiaca. Mientras que Braveheart y Carmn son necesarios para que las células que van a formar el futuro corazón se comprometan a formar parte del linaje cardiaco y una correcta homeostasis adulta, Fendrr es necesario para el correcto desarrollo de los tejidos derivados del mesodermo, entre los que se incluye el corazón. El objetivo de este estudio es determinar la expresión de cada una de las isoformas de estos lncRNAs en las cámaras cardiacas del corazón embrionario y del corazón adulto, así como determinar su posible relación con el factor de transcripción Mef2c. Utilizando PCR, se analizó la expresión de las isoformas de Braveheart, Fendrr y Carmn en las distintas cámaras cardíacas durante el desarrollo embrionario y en la etapa adulto. Asimismo, mediante ensayos de ganancia y pérdida de función de Mef2c in vitro, se estudió el papel modulador de este factor de transcripción cardiaco sobre las distintas isoformas. Los resultados muestran la expresión de todas las isoformas tanto en el corazón embrionario como en el adulto, excepto para la isoforma 2 de Fendrr. Del mismo modo se observa que todas las isoformas, excepto la isoforma 1 de Braveheart, son moduladas por Mef2c. Por lo tanto, estos datos sugieren que la mayoría de las isoformas muestran un patrón de expresión similar y que participan tanto en la embriogénesis cardiaca como en la homeostasis adulta. A su vez son moduladas por Mef2c, lo que sugiere que podrían formar parte de las cascadas de señalización cardiacas.

[EN] LncRNAs have emerged as key regulators in a multitude of cellular processes. Among these processes is embryonic development. Cardiac embryogenesis is a highly regulated process that requires the participation of a multitude of genes, both coding and non-coding, to produce and correctly generate a functional heart capable of sustaining adult life. In this context, several cardiac lncRNAs have been described, including Braveheart, Carmn and Fendrr, which play a role in early cardiac embryogenesis. While Braveheart and Carmn are necessary for the cells that will form the future heart to commit themselves to be part of the cardiac lineage and correct adult homeostasis, Fendrr is necessary for the proper development of the tissues derived from the mesoderm, among which includes the heart. The aim of this study is to determine the expression of each of the isoforms of these lncRNAs in the cardiac chambers of the embryonic heart and the adult heart, as well as to determine its possible relationship with the transcription factor Mef2c. Using PCR, the expression of the Braveheart, Fendrr and Carmn isoforms was analyzed in the different cardiac chambers during embryonic development and in the adult stage. Likewise, through gain and loss of function of Mef2c approaches in vitro, the modulatory role of this cardiac transcription factor on the different isoforms was studied. The results show the expression of all isoforms both in the embryonic and adult, except for Fendrr isoform 2. Similarly, all isoforms, except Braveheart isoform 1, are distinctly modulated by Mef2c. Therefore, these data suggest that most isoforms show a similar pattern of expression and that they participate in both cardiac embryogenesis and adult homeostasis. They are also modulated by Mef2c, suggesting that they could be part of this cardiac signaling cascade.