Análisis de la regulación de factores de transcripción PAX mediados por microRNAs

Abstract

[ES] Durante el desarrollo embrionario, los somitos derivan a partir de la hoja mesodérmica paraxial, dando lugar al esclerotomo, miotomo y dermatomo. El miotomo es la región del embrión encargada de formar el músculo esquelético. La miogénesis es un proceso complejo de señalización celular mediado por distintos factores de regulación miogénicos (MRFs). La activación de estos factores miogénicos viene regulada por la expresión de ciertos genes, tales como PAX3 y PAX7. Los microRNA son pequeñas secuencias de RNA no codificante que regulan post-transcripcionalmente la expresión de múltiples genes, produciendo la inhibición de la transcripción y/o su degradación. En este estudio, hemos analizado si existe un papel regulador por parte de tres microRNAs distintos (miR-23b, miR-27b y miR-219) sobre los factores de transcripción PAXI, PAX3 y PAX7. Para ello, aislamos explantes de somitos de ratón de 9.5 días de desarrollo y los transfectamos con los microRNA anteriormente citados y medimos la expresión de los genes PAX mediante un qRT-PCR. Se observó que miR-23b modula la expresión de PAXl, PAX3 y PAX7, no siendo así para el miR-27b y para el miR-219, que no modulan la expresión de estos genes.

[EN] During embryonic development, the somites derive from the paraxial mesodermal sheet, which will be differentiated in the sclerotome, myotome and dermatome. The myotome is the region of the embryo responsible for forming skeletal muscle. This is a complex cellular signaling process, which is mediated by MRF myogenic regulatory factors. The activation of these factors is regulated by the expression of certain genes, such as P AX3 and P AX7 which, in turn, are controlled by the action of microRN A. MicroRNAs are small sequences of non-coding RNA that regulate certain types of genes, producing transcription inhibition or degradation. In this study, we have observed if there is such a regulatory role of three types of microRNA (miR23b, miR27b and miR219) on three different genes (PAXI, PAX3 and PAX7). For this purpose, we isolated explants of mouse somites from 9.5 days of development and transfected them with the microRNAs mentioned above and we measured the expression of the PAX genes by means of a qRTPCR. lt was observed that miR-23b modulates the expression of PAXl, PAX3 and PAX7 not being so for miR-27b and for miR-219, that they do not modula te the expression of these genes.